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液相色譜系統中的檢測系統有哪些類型

更新時間:2020-06-08        閱讀:4200
液相色譜有五大系統構成:溶劑輸送系統(脫氣機、高壓泵等)、進樣系統(定量泵、六通閥、定量環、進樣針等)、分離系統(色譜柱等)、檢測系統(檢測器等)、記錄及數據處理系統。其中檢測系統常用的檢測器有包括紫外可見吸收檢測器(UVD)、熒光檢測器(FD)、蒸發光檢測器(ELSD)、示差折光檢測器(RID)、電化學檢測器(ED)、化學發光檢測器(CD)、質譜檢測器(MS)等類型,其技術要求為靈敏度高、噪音低、線形范圍寬、響應快。
 
1、紫外可見吸收檢測器(UVD):波長范圍190~800mm,190~400mm為紫外區域,氘燈,400~800mm為可見光區域,鎢燈。其特點為靈敏度高,小檢測濃度10-9g/ml,線性范圍寬,對溫度和流速不敏感,可進行梯度洗脫,應用范圍廣。適用于帶有共軛基團的化合物,為常用的檢測器。
 
2、熒光檢測器(FD):氘燈作激發光源,波長范圍250~600nm。其特點為靈敏度更高,檢測限10-12~10-13g/ml(靈敏度比UV檢測器高2~3個數量級),選擇性好,對溫度和流速不敏感,可進行梯度洗脫,所需試樣量少,適于痕量分析,應用于組分吸收一定波長紫外光后發射熒光的物質,且熒光強度與濃度成正比。
 
3、蒸發光檢測器(ELSD):是一種通用型的檢測器,可檢測揮發性低于流動相的任何樣品,而不需要樣品含有發色基團。蒸發光散射檢測器靈敏度比示差折光檢測器高,對溫度變化不敏感,基線穩定,適合與梯度洗脫液相色譜聯用。被廣泛應用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、藥物以及聚合物等的檢測。其主要缺點為響應值與濃度不呈線性,需取響應值的對數與濃度計算線性。
 
4、示差折光檢測器(RID):是一種連續檢測樣品流路與參比流路間液體折光指數差值的通用型檢測器,其優點為對糖類檢測靈敏度較高,其檢測限可達10-8g/ml;穩定性好,操作方便,缺點該檢測器對多數物質的靈敏度低(約10-5g/ml),通常不用于痕量分析;受環境溫度、流動相組成等波動的影響較大,不適合梯度洗脫。
 
5、質譜檢測器(MS):將樣品中的分析物電離,不同質量離子在電場或磁場中,將按其質量和所帶的電荷比(質荷比,m/z)進行的分離和排序,根據質荷比的大小和相對強度形成規則的質譜,從而對物質進行結構鑒別和定量分析。質譜分析具有靈敏度高,樣品用量少,分析速度快,分離和鑒定同時進行等優點,但流動相中不能含有無機鹽。

 

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